黄曲霉毒素M1(AFM1)ELISA 检测试剂盒
更新时间:2016-02-18 11:54:22 信息编号:4431997 发布者IP:60.171.110.180 浏览:124次- 供应商
- 上海聚益畜牧科技有限公司 商铺
- 认证
- 资质核验:已通过营业执照认证入驻顺企:第10年主体名称:上海聚益畜牧科技有限公司组织机构代码:310116003204663
- 报价
- 人民币¥1700.00元每个
- 测量精度
- 试剂盒的变异系数均小于10%
- 类型
- 检测试剂盒
- 用途
- 本试剂盒是应用ELISA 技术研发的药物残留检测产品
- 关键词
- 黄曲霉毒素M1(AFM1)ELISA 检测试剂盒,黄曲霉素,检测试剂盒
- 所在地
- 上海市金山区枫泾镇曹黎路38弄19号1223室
- 联系电话
- 0555-8210820
- 手机号
- 13817091262
- 总经理
- 李鲲鹏 请说明来自顺企网,优惠更多
产品详细介绍
一、检测原理
本试剂盒采用间接竞争ELISA 方法,样品中游离的黄
曲霉毒素M1 与酶标板上固相包被的黄曲霉毒素M1 抗原
竞争结合特异性抗体,酶标二抗可与抗体反应,再通过酶
的专一性显色剂显色,因为酶可以使无色的显色剂转变成
蓝色,终止液的加入可以终止显色,蓝色转变成黄色,吸
收值可以在450nm 处进行测定。颜色变化的程度反映样品
中黄曲霉毒素M1 的含量。
二、检测范围
本试剂盒是应用ELISA 技术研发的药物残留检测产品,
与仪器分析技术比较,能经济、快速地检测出液态奶、奶
粉、酸奶、奶酪等样本中的黄曲霉毒素M1。
三、交叉反应率
黄曲霉毒素M1…………………………………
四、试剂盒组成
酶标板1 块,96 孔/板
标准液6 瓶(1ml/瓶):
0 ppb、0.05 ppb、0.15 ppb、0.45 ppb、1.35 ppb、4.05 ppb
抗体工作液……………………………………………5mL
酶标记物……………………………………………10mL
底物液A ……………………………………………7mL
底物液B ……………………………………………7mL
终止液…………………… ..……… ………… .. .…7mL
10× 浓缩酸奶样品稀释液………………………5mL
10× 浓缩洗涤液………………….…...…………40mL
2× 浓缩样品稀释液………………. ..…………50mL
说明书…… … … … … … … . . … … … . .… … … 1 份
五、使用单位需自备的设备及试剂
(1)仪器
微孔板酶标仪(450 nm/630 nm)
振荡器;离心机;涡旋仪;
电子天平(感量0.01 g)
(2)器材
单道微量移液器:20 μL~200 μL,100 μL~1000 μL
多道微量移液器:30 μL~300 μL
(3)试剂
去离子水
五、溶液的配制
配液1: 样品稀释液
用去离子水将浓缩样品稀释液按1:1 体积比进行稀释,
即1 份浓缩样品稀释液加1 份去离子水。
配液2: 洗涤工作液
用去离子水将浓缩洗涤液按1:9 体积比进行稀释,即
1 份浓缩洗涤液加9 份去离子水,用于酶标板的洗涤,
洗涤工作液在4℃环境可保存一个月。
配液3: 酸奶样品稀释液:将浓缩酸奶样品稀释液用去离子
水按1:9 体积比进行稀释(1 份浓缩酸奶样品稀释液
+9 份去离子水)。
配液4:样品提取液:将甲醇和浓缩样品稀释液按1:3 体积
比例进行混匀(1 份甲醇+3 份浓缩样品稀释液)。
六、样本前处理方法
样本处理前须知:
(1)实验中必须使用一次性吸头,在吸取不同的试剂时要
更换吸头。
(2)实验之前须检查各种实验器具是否干净,必须使用洁
净实验器具,以避免污染干扰实验结果。
样本前处理步骤:
(一)液态奶(含生鲜奶及成品液态奶)
1、取待测样品,3000rmp 室温下离心10min(除去脂肪层);
2、下层500μL 待测样本,加入500μL 样品稀释液混匀2min;
3、取下层50μL 用于分析。
稀释倍数:2
(二)酸奶
1、称取0.5g 待测样品,加入500μL 酸奶样品稀释液,混
匀2min;
2、7000rmp 室温下离心10min
3、取下层50 μL 用于分析。
稀释倍数:2
(三)奶粉
1、称取1 g 样品,加入6mL 乙腈,混匀2min;
2、3000rpm 室温下离心,10min;取上清3ml,50℃氮吹;
3、加入0.5ml 浓缩样品稀释液复溶,再加入0.5ml 正己烷
混匀2min,3000rpm 室温下离心,5min;
4、取下层50μL 用于分析。
稀释倍数:1
(二)奶酪
1、取1g 研磨后的奶酪,加入6ml 甲醇,7000rpm 室温下
离心,5min;
2、取下层2ml,60℃氮吹;
3、加入1ml 石油醚,再加入2ml 样品提取液,混匀2min;
4、5000rpm 室温下离心,5min;
5、取下层50 μL 用于分析。
稀释倍数:6
七、酶联免疫检测步骤
测定前须知:
1、使用之前将所有试剂和需用微孔板回升至室温。
2、使用之后立即将所有试剂放回2~8 ℃。
3、在使用中不要让微孔干燥。
4、在ELISA 分析中的重复性,很大程度上取决于洗板的一
致性,正确的洗板操作是ELISA 测定程序中的要点。
5、在所有恒温孵育过程中,避免光线照射,用盖板膜盖住
微孔板。
测定步骤:
1、将所需试剂和微孔板从冷藏环境中取出,在室温下平衡
30 min,每种液体使用前均须摇匀。注意标准液均需做2
个平行试验。
2、加标准品:加入标准品/样品50 μL/孔,再加抗体工作液
50 μL/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖好,室温25 ℃下
避光反应15 min。
3、洗板:小心揭开盖板膜,将孔内液体甩干,加洗涤液300
μL/孔,每次浸泡15~30 s,充分洗涤4~5 次,用吸水纸
拍干。
4、加结合物:加入酶标记物100 ??L/孔,轻轻振荡混匀,用
盖板膜盖板后置25℃避光环境中反应15min,取出重复
洗板步骤3。
5、显色:每孔先各加入底物液A 50 μL,再各加入底物液B
50 μL,轻轻振荡混匀,并在室温25℃下避光反应10~15
min。
6、测定:每孔各加50 μL 终止液,设定酶标仪在450 nm 处,
测定OD 值(建议用450/630 nm 双波长检测,在5 min
内读完数据)。
八、结果分析
所测得的标准液或样品吸光度的平均值(B)除以
第一个标准液(0 标准液)的吸光度(B0)值再乘以,
得到百分吸光度值。
百分吸光度值(%)=
B
B
0
??
以标准品浓度的10 为底的对数为X 轴, 百分吸光
值为Y 轴,绘制标准曲线。将样本的百分吸光值代入标
准曲线,从标准曲线上读出样本所对应的值,作为10 的
幂,乘以稀释倍数,即为样品中所含黄曲霉毒素M1 的量。
利用试剂盒专业分析软件进行计算,更便于大量样品
的准确、快速分析。
九、试剂盒灵敏度、准确度、精密度
灵敏度:0.05 ppb
检测限:
液态奶…………………………………0.1ppb
酸奶……………………………………0.1pb
奶粉…………………………………0.25ppb
奶酪…………………………………0.3pb
回收率:80±15%
精密度:试剂盒的变异系数均小于10%
十、注意事项
1、室温低于20 ℃或试剂及样本没有回到室温(20~
25 ℃)会导致所有标准的OD 值偏低。
2、在洗板过程中如果出现板孔干燥的情况,则会出现标
准曲线不成线性,重复性不好的现象,所以洗板拍干
后应立即进行下一步操作。
3、反应终止液为2M 硫酸,避免接触皮肤;若不慎滴漏
到皮肤上,请尽快用水冲洗。
4、不要使用过了有效日期的试剂盒;也不要使用过了有
效期的试剂盒中的任何试剂,掺杂使用过了有效期的
试剂盒会引起灵敏度的降低;不要交换使用不同批号
试剂盒中的试剂。
5、保存试剂盒于2~8 ℃,不要冷冻,将不用的微孔板放
进自封袋重新密封;标准物质和无色的发色剂对光敏
感,因此要避免直接暴露在光线下。
6、显色试剂有任何颜色表明发色剂变质,应当弃之;0
标准的吸光度(450 nm)值小于0.5(A450nm< 0.5)时,
表示试剂可能变质。
7、在加入底物液后,一般显色15 min 即可。若颜色较
浅,可延长反应时间到20 min(或更长),但不得超
过30 min;反之,则减短反应时间。
8、该试剂盒反应温度为25 ℃是特好的,温度过高或过低将
导致检测吸光度值和灵敏度发生变化。
十一、贮藏条件及保存期
贮藏条件:在2~8 ℃保存试剂盒。
保存期:本试剂盒有效期为12 个月。
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类型:检测仪器 - 塑料奶衬内衬专用刷子17.00元/个
价格是否含税:否 - 300毫升可回流不可回流,奶牛乳头消毒专用药浴瓶21.00元/个
容量:300ml - 240cc 集乳器,牛用挤奶机专用集乳器93.00元/个
适用对象:牛、羊 - 不锈钢无盖小型12L水桶,周转桶,奶桶,手提奶桶50.00元/个
适用范围:家用,牧场用,水桶,周转桶,奶桶 - 黄曲霉毒素M1检测试纸条22.00元/个
测量范围:小于0.5μg/kg(ppb) - 氯霉素快速检测板18.00元/个
测量范围:2 ppb - 玉牌双层奶牛擦拭纸39.00元/卷
品牌:玉牌 - 经济型 单层奶牛擦拭纸29.00元/卷
用途:家用,奶牛用 - 不锈钢挤奶桶盖子,桶盖含垫圈,挤奶机挤奶桶配件43.00元/个
材质:不锈钢