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Polyfectine转染试剂

更新时间:2013-07-12 16:08:03 信息编号:2183036 发布者IP:183.37.33.50 浏览:128次
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产品详细介绍

Polyfectine转染试剂

产品简介:

Polyfectine转染试剂是百恩维生物公司(Biowit Technologies)Zui新研发合成的新型纳米聚合物高效转染试剂,既可以转染分裂细胞也可以转染非分裂细胞。由于纳米技术的应用,Polyfectine在细胞转染过程中,表现了卓越的低毒、高效的性能,可用于悬浮细胞(如293-F、CHO-S等)的转染,更可用于In vivo动物体内的高效转染。

产品货号: PL0001

运输与储存:常温运输,储存于4℃,有效期12个月

贴壁细胞操作步骤:(以6孔板为例)

1. 在转染前一天按每孔3~5×105个细胞接种细胞。转染前2~4小时,用无双抗的完全培养基换液。

2. 转染复合物的制备:

⑴ 取4μg DNA 用250μl无血清稀释培养基(建议采用OPTI-MEM、无血清DMEM或RPMI1640)稀释,充分混匀,制成DNA稀释液。 

⑵ 取4~8μl Polyfectine加入到DNA稀释液中,充分混匀,室温静置15分钟。

3. 转染 :

将转染复合物加入到含有细胞和完全培养基的6孔板中,轻柔混匀,培养4~6小时后更换培养基,于37℃ ,5% CO2培养箱中继续培养24~48h。

表格:不同细胞培养容器转染用量

细胞培养容器

细胞培养面积

需要培养基的量

稀释用培养基的量

DNA转染

RNAi转染

DNA

Polyfectine

RNA

Polyfectine

96孔板

0.3cm2

100ul

25ul

0.2ug

0.2~0.4ul

5pmol

0.1~0.2ul

24孔板

2cm2

500ul

50ul

0.8ug

0.8~1.6ul

20pmol

0.4~0.8ul

12孔板

4cm2

1ml

100ul

1.6ug

1.6~3.2ul

40pmol

0.8~1.6ul

6孔板

10cm2

2ml

250ul

4.0ug

4.0~8.0ul

100pmol

2.0~4.0ul

60mm平皿

20cm2

5ml

0.5ml

8.0ug

8.0~16ul

200pmol

4.0~8.0ul

100mm平皿

60cm2

15ml

1.5ml

24ug

24~48ul

600pmol

12~24ul

悬浮细胞操作步骤:(以50ml培养液为例)

1. 在转染前一天按6~7×105个细胞/ml接种细胞,待转染时细胞密度应在1×106个细胞/ml。

2. 转染复合物的制备:

⑴ 取50μg DNA 用2ml无血清完全培养基稀释,充分混匀,制成DNA稀释液。 

⑵ 取50~100μl Polyfectine加入到DNA稀释液中,充分混匀,室温静置15分钟。

3. 转染 :

将转染复合物加入到含有48ml细胞和无血清完全培养基的125ml细胞培养摇瓶中,轻柔充分混匀,125rpm,37℃ ,8% CO2细胞培养摇床中继续培养24~96h。

产品用于:

仅供研究使用,不适用于人或动物的体外诊断与治疗。

所属分类:中国医药保养网 / 其他生物制品
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