Polyfectine转染试剂
更新时间:2013-07-12 16:08:03 信息编号:2183036 发布者IP:183.37.33.50 浏览:175次- 供应商
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产品详细介绍
Polyfectine转染试剂
产品简介:
Polyfectine转染试剂是百恩维生物公司(Biowit Technologies)Zui新研发合成的新型纳米聚合物高效转染试剂,既可以转染分裂细胞也可以转染非分裂细胞。由于纳米技术的应用,Polyfectine在细胞转染过程中,表现了卓越的低毒、高效的性能,可用于悬浮细胞(如293-F、CHO-S等)的转染,更可用于In vivo动物体内的高效转染。
产品货号: PL0001
运输与储存:常温运输,储存于4℃,有效期12个月
贴壁细胞操作步骤:(以6孔板为例)
1. 在转染前一天按每孔3~5×105个细胞接种细胞。转染前2~4小时,用无双抗的完全培养基换液。
2. 转染复合物的制备:
⑴ 取4μg DNA 用250μl无血清稀释培养基(建议采用OPTI-MEM、无血清DMEM或RPMI1640)稀释,充分混匀,制成DNA稀释液。
⑵ 取4~8μl Polyfectine加入到DNA稀释液中,充分混匀,室温静置15分钟。
3. 转染 :
将转染复合物加入到含有细胞和完全培养基的6孔板中,轻柔混匀,培养4~6小时后更换培养基,于37℃ ,5% CO2培养箱中继续培养24~48h。
表格:不同细胞培养容器转染用量
细胞培养容器 |
细胞培养面积 |
需要培养基的量 |
稀释用培养基的量 |
DNA转染 |
RNAi转染 |
||
DNA |
Polyfectine |
RNA |
Polyfectine |
||||
96孔板 |
0.3cm2 |
100ul |
25ul |
0.2ug |
0.2~0.4ul |
5pmol |
0.1~0.2ul |
24孔板 |
2cm2 |
500ul |
50ul |
0.8ug |
0.8~1.6ul |
20pmol |
0.4~0.8ul |
12孔板 |
4cm2 |
1ml |
100ul |
1.6ug |
1.6~3.2ul |
40pmol |
0.8~1.6ul |
6孔板 |
10cm2 |
2ml |
250ul |
4.0ug |
4.0~8.0ul |
100pmol |
2.0~4.0ul |
60mm平皿 |
20cm2 |
5ml |
0.5ml |
8.0ug |
8.0~16ul |
200pmol |
4.0~8.0ul |
100mm平皿 |
60cm2 |
15ml |
1.5ml |
24ug |
24~48ul |
600pmol |
12~24ul |
悬浮细胞操作步骤:(以50ml培养液为例)
1. 在转染前一天按6~7×105个细胞/ml接种细胞,待转染时细胞密度应在1×106个细胞/ml。
2. 转染复合物的制备:
⑴ 取50μg DNA 用2ml无血清完全培养基稀释,充分混匀,制成DNA稀释液。
⑵ 取50~100μl Polyfectine加入到DNA稀释液中,充分混匀,室温静置15分钟。
3. 转染 :
将转染复合物加入到含有48ml细胞和无血清完全培养基的125ml细胞培养摇瓶中,轻柔充分混匀,125rpm,37℃ ,8% CO2细胞培养摇床中继续培养24~96h。
产品用于:
仅供研究使用,不适用于人或动物的体外诊断与治疗。
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