荧光定量pcr(real-time pcr)技术
通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针,对pcr产物进行标记跟踪,实时在线监控反应过程,结合相应的软件可以对产物进行分析,计算待测样品模板的初始浓。具有应用范围广、灵敏度高、操作简便、特异性和可靠性更强、自动化程度高、无污染性、具实时性和准确性等特点。
实验步骤
1. 根据基因序列设计特异性的引物和荧光探针;
2.从细胞或组织中提取总rna,检测rna样本od值, od260/od280比值在1.8到2.0之间
3.将提取的总rna反转录成cdna
4.将cdna进行real time rt-pcr反应,并进行定量分析。对管家基因与内参基因进行同等操作,用所得到的值进行校正,Zui后求得目的基因的相对表达量
交货内容
完整的实验报告,包括实验过程、所用仪器及试剂、扩增曲线、标准曲线和相关分析数据
服务说明
1. 请提供尽量多的实验材料:细胞数应为106以上,组织应为100 mg以上;
2.客户在实验开始前提供目的基因的相关信息(基因名称、序列等信息),并验证组织或细胞中存在该基因表达;
3. pcr所需引物/探针(如果用探针法),可以由您自己提供,也可以委托本公司设计合成。如果由您自己提供,必须是page纯化的高质量的干粉,本公司不接受已溶解的引物/探针。
服务承诺:
1. 检测结果准确、客观、可信,但不能确保一定要得到某特定结果。
2. 在规定时间内以Zui快速将实验完成