产品名称 | Stbl3感受态细胞 |
---|---|
公司名称 | 安徽吐露港生物科技有限公司 |
价格 | 1.00/个 |
规格参数 | 吐露港生物:tolobio 10支/包:100ul/支 100支/盒:100ul/支 |
公司地址 | 安徽省滁州市世纪大道801号(昭阳工业园)8#二层东北侧(注册地址) |
联系电话 | 17755092299 |
产品简介
Stbl3菌株来源于大肠杆菌HB101菌株,是慢病毒载体系统推荐使用的菌株。基因组带有重组酶recA13突变,可有效抑制长片段末端重复区的重组,降低错误重组的概率;但由于菌株不含核酸酶endA1突变,因此体内核酸酶含量较高,在提取质粒时务必使用质粒提取试剂盒中的去蛋白液进行处理,否则抽提出的质粒很不稳定,易降解。此菌株具有链霉素抗性,不存在lacIqZΔM15,不可用于蓝/白斑筛选实验。经pUC18转化检测,Stbl3感受态细胞的效率可达108 cfu/μg DNA。
产品组成
组分 | CC96134-01 | CC96134-02 | CC96134-03 |
Stbl3化学感受态细胞 | 10 × 100 μL | 100 × 100 μL | 定制 |
基因型:F- mcrB mrr hsdS20(rB- mB-) recA13 supE44 ara-14 galK2 lacY1 proA2 rpsL20 (StrR) xyl-5 λ- leu mtl-1 endA1+
存储条件
-80 ℃保存;请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
产品特性
-属于大肠杆菌K株系列,主要用于目标基因的克隆和质粒的保存;不可用于以T7 RNA聚合酶为表达系统的蛋白表达;
-该菌株适合克隆不稳定插入片段,甲基化的基因组序列,以及慢病毒载体的构建。
质量控制
无外源质粒DNA残留;
化学法转化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出,置于冰浴中融化;
2. 将待转化DNA加入到100 μL感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上孵育30 min;
3. 将离心管置于42 ℃水浴锅中,不要晃动,热激90 s后,立刻置于冰浴中静置2-3 min;
4. 向离心管中加入900 μL LB或SOC培养基(室温或37 ℃预热),然后置于37 ℃摇床复壮45 min;
5. 取不同体积的转化产物,用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上,于37 ℃培养箱培养过夜。
注意事项
1. 感受态细胞冰浴中解冻后应立即使用;
2. 加入的待转化DNA的总体积不应超过感受态细胞体积的1/10;
3. 加入待转化DNA后,不要用移液器吹吸感受态细胞,仅用手指轻弹即可;
4. 为确保最高转化效率,整个操作过程中除热激外均要保持低温,并且要尽量轻柔。