产品名称 | BL21(DE3)感受态细胞 |
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公司名称 | 安徽吐露港生物科技有限公司 |
价格 | 1.00/个 |
规格参数 | 吐露港生物:tolobio 10支/包:100ul/支 100支/盒:100ul/支 |
公司地址 | 安徽省滁州市世纪大道801号(昭阳工业园)8#二层东北侧(注册地址) |
联系电话 | 17755092299 |
产品简介
本品为使用大肠杆菌BL21(DE3)菌株制备的高效化学感受态细胞,转化效率超过107 cfu/μg DNA,可以用于pET等系列质粒的蛋白高效表达。
产品组成
组分 | CC96107-01 | CC96107-02 | CC96107-03 |
BL21(DE3)感受态细胞 | 10 × 100 μL | 100 × 100 μL | 定制 |
基因型:F- ompT hsdSB (rB-mB-) gal dcm (DE3)
存储条件
-80 ℃保存;请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
产品特性
-BL21(DE3)品系,T7 RNA聚合酶位于λ噬菌体DE3区,该区域被整合于BL21的染色体上;
-是以T7 RNA聚合酶为表达系统的高效蛋白表达宿主,适合于非病毒蛋白重组表达。
质量控制
无外源质粒DNA残留;
化学法转化效率≥107 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出,置于冰水浴中融化;
2. 将待转化DNA加入到100 μL感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上孵育30 min;
3. 将离心管置于42 ℃水浴锅中,不要晃动,热激90 s后,立刻置于冰水浴中静置2-3 min;
4. 向离心管中加入900 μL LB或SOC培养基(室温或37 ℃预热),然后置于37 ℃摇床复壮45 min;
5. 取不同体积的转化产物,用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上,于37 ℃培养箱培养过夜。
注意事项
1. 感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用;
2. 加入的待转化DNA的总体积不应超过感受态细胞体积的1/10;
3. 加入待转化DNA后,不要用移液器吹吸感受态细胞,仅用手指轻弹即可;
4. 为确保最高转化效率,整个操作过程中除热激外均要保持低温,并且要尽量轻柔。