Golgi定位EGFP稳转细胞株（293）

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货号：cy009

golgi-egfp稳定表达293细胞株表达人b4galt1基因（geneid：2683）n端82 aa信号肽和egfp的融合蛋白，定位于细胞高尔基体，该细胞高尔基体为绿色荧光蛋白标记，可用于高尔基体定位实验或高尔基体定位基因的研究。

细胞特性：

细胞来源：hek293v细胞（人胚肾细胞）

表达蛋白：golgi定位egfp蛋白

构建载体：plv-golgi-egfp（货号vl3505）

筛选抗生素：嘌呤霉素

培养基：dmem高糖培养基+10%fbs

细胞培养方法：

以25cm培养瓶传代为例。

1、传代前将细胞培养液、pbs和胰蛋白酶温浴到37℃。

2、吸去细胞培养液。

3、用pbs漂洗1到2次。

4、加入3ml胰蛋白酶，轻轻晃动细胞瓶，使胰蛋白酶均匀覆盖细胞。吸去胰蛋白酶，将培养瓶放置在细胞培养箱中，37摄氏度消化。由于配制的胰蛋白酶活力有差别，消化时间可用30秒到1分钟。应在倒置显微镜下观察，看到细胞分开及稍微变圆即可。

5、加入5ml 细胞培养基，用吸管轻柔吹打分散细胞。

6、按1:4到1:5接种细胞。