姑苏区饲料产气荚膜梭菌检测

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饲料中产气荚膜梭菌的检测

1范围

本标准规定了饲料中产气荚膜梭菌的检验方法。本标准适用于饲料中产气荚膜梭菌的检测。

3原理

3.1在平板中接种特定量待测液体样品,或特定量其他类型待测样品初始悬液。在相同条件下接种待测样品或初始悬液的十倍梯度稀释物。浇注一层选择性培养基,凝固后再浇注一层此培养基覆盖。3.2平板于37℃厌氧培养20 hi2 h。

3.3典型菌落计数。

3.4典型菌落的数量用确证试验证实,进一步计算每毫升或每克试样中产气荚膜梭菌数。

8操作步骤

8.1检样制备.初始悬液和十倍稀释

以无菌操作称取试样25 g(mL)加人225 mL蛋白陈生理盐水稀释液(4.1),均质1 min~2 min,制成1∶10的稀释液。吸取1∶10的稀释液1 mL,加入9 mL蛋白陈生理盐水稀释液,经充分混匀后制成1 ∶ 100的稀释液。更高稀释度可按此方法操作。

8.2接种和培养

用无菌移液管吸取1 mL初始悬液(若样品本身为液体,则直接吸取样液)加入到灭菌空平皿中央，每个样品做两个重复,每个平板浇注44℃~47℃水浴保温的SC培养基(4.2)10 mL~15 mL,柔和转动平板,使稀释液与培养基充分混匀。培养基凝固后,再于其上浇注10 mL的SC培养基,待其凝固后，将平板倒置于厌氧培养装置(5.3)内,37℃厌氧培养20 h士2 h。培养时间不宜过长,否则会导致平板过度黑化。

采用同样操作步骤进行1∶100的稀释物的接种和培养,必要时可采用同样操作步骤进行更高适宜稀释物的接种和培养。