产品名称 | Rac kit 武汉纽斯特 |
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公司名称 | 武汉纽斯特生物技术有限公司 |
价格 | 面议 |
规格参数 | |
公司地址 | 湖北省武汉市东湖新技术开发区高新大道666号光谷生物城B3-3栋3楼 |
联系电话 | 15002729010 15002729010 |
分析原理
NewEast Biosciences Arl1激l活检测试剂盒基于配置特异性抗Arl1-GTP从细胞提取物或体外检测活性Arl1-GTP水平的单克l隆抗l体GTPγS负载Arl1活化分析。简而言之,抗活性Arl1小鼠单克l隆抗l体将用含有Arl1-GTP的细胞裂解液培养。然后,Rac kit,绑定的活动Arl1将被下拉蛋白质A/G琼脂糖。用抗Arl1兔多克l隆抗l体或抗Arl1小鼠单克l隆抗l体进行免l疫印迹分析,检测沉淀的活性Arl1。
需要但未提供的材料
1刺激性和非刺激性细胞裂解物
2蛋白酶抑制素
4°C摇管器或振动筛
40.5 M EDTA,pH8.0
51百万氯化镁
62X还原SDS-PAGE样品缓冲液
7电泳和免l疫印迹系统
8免l疫印迹洗涤缓冲液,如TBST(10 mM Tris HCl,pH 7.4,0.15 M NaCl,0.05%
吐温-20)
9免l疫印迹阻断缓冲液(含5%脱脂奶粉或3%牛血l清白蛋白的TBST)
10PVDF或硝化纤维膜
11次级抗l体
12ECL检测试剂
Arf6激l活测定。 经GDP(lane1)或GTPγS(lane 2)处理后,纯化的Arf6蛋白被免l疫沉淀。 用抗活性Arf6单克l隆抗l体进行免l疫沉淀。
1.抗活性Arf 6,小鼠单克l隆抗l体(货号26918):一小瓶– 22 μL(1
含50%甘油和0.05%叠氮l化钠的PBS(pH 7.4)中的浓度(mg / ml)。 该抗l体特异性识别所有脊椎动物的Arf 6-GTP。
2.蛋白A / G琼脂糖(目录号30301):一小瓶– 400 μL 50%浆液。
3. 5X测定/裂解缓冲液(目录号30302):一瓶– 30 mL的250 mM Tris-HCl,pH 8,750mM NaCl,50 mM MgCl2,5 mM EDTA,5%Triton X-100。
4.抗Arf 6,兔多克l隆抗l体(货号21032):一小瓶– 100 μL(1 mg / ml)
pH 7.4的PBS中含有50%的甘油。
5. 100 XGTPγS(目录号30303):1瓶– 100 μl,10 mM,使用5 μLGTPγS标记0.5 mL细胞裂解液。
6. 100 X GDP(产品目录号30304):一个样品瓶– 100 μl,100 mM,使用5 μL GDP标记0.5 mL细胞裂解物。