2xTaq plus PCR Mix

 2×taq plus pcr master mix

●产品内容                           

●产品说明 

1.2×taq plus pcr master mix是一种优化的两倍浓度的pcr预混合液。适用于     保真性要求高、模板gc含量高和扩增片段长的pcr，简单模板可以扩增长达       15kb，复杂模板可达10 kb。

2.pcr增强剂和蛋白稳定剂协同提高了pcr效率和灵敏度，非常适合低拷贝模板增。

3.产品使用方便，只需要取0.5倍pcr体系体积的2×taq plus pcr master mix，

加入引物和模板，以dih2o补足体积，可减少加样误差。

4.产品分为含染和不含染料两种，含染料的产品反应结束后可以直接电泳。

●储存条件

-20°c长期保存；如果频繁使用，建议储存于4°c。

●注意事项

1.使用适量的模板dna

请参考●pcr体系成分△模板dna用量。

2.递减pcr(touch down pcr)

pcr起始的几个循环使用严紧的退火条件。虽然扩增效率低，但靶序列特异性Zui高，被优先扩增，其产物在后续循环中继续占优势，从而提高特异性。

退火温度从高于tm 5°c开始，每个循环递减，直到低于tm 5°c；一般用10个循环，每个循环降低1°c。之后用低于tm 5°c作为退火温度，再进行20个循环。

3.巢式pcr(nested pcr)

用两对引物进行两次pcr。第一对引物(外引物)从多个靶位点扩增产生特异性和非特异性产物。第二对引物(巢式引物)位于第一对引物内侧，只能与第一次pcr产生的特异性产物互补(因为同时能与两对引物互补的非特异序列极少)。即：第一次pcr产生的特异性产物在第二次pcr中占优势被扩增。

一般，第一次pcr用15~20个循环，其产物稀释100~1000倍后作为模板进行第二次pcr。

●其他说明

详细参见产品说明书