DIGE技术服务

辉骏生物已成功为各地科研单位服务超过3000张双向凝胶电泳，数据已发表在专业杂志Proteomics. 上。


一、DIGE概述
DIGE — 双向荧光差异凝胶电泳(Two-dimensional fluorescence difference gel electrophoresis,2D-DIGE)，是在传统双向电泳的基础上发展而来的新型蛋白质组学定量技术，其分离蛋白质混合的原理与双向电泳是一致的，主要利用蛋白质的等电点和分子量的差异来分离蛋白质混合物，同时应用荧光染料的灵敏度及内标的使用等技术，使其在定量蛋白质组学的研究中效果明显优于传统双向电泳。
DIGE使用的荧光染料有Cy2, Cy3和Cy5，它们能与蛋白质的赖氨酸侧链氨基反应而使蛋白质被标记，被标记蛋白质的等电点和分子量几乎不受影响，等量混合标记好的蛋白质后进行双向电泳，不同凝胶之间可以通过cy2内标匹配，消除凝胶之间的差异，蛋白质表达量的变化则通过cy3和cy5不同荧光的强度来体现。

二、与常规双向电泳后，银染或考染胶相比，DIGE具有以下优势：
1、灵敏度高，Zui低可检测到125pg的蛋白质；
2、高效性，同一块凝胶上可以电泳两个样品，减轻了工作量；
3、线性范围更广,动态范围高达10-5；
4、定量, 采用内标消除了凝胶与凝胶之间的实验误差，显著提高了实验的度和可重复性；
5、统计学分析，ImageMaster7.0（DIGE）软件可以得到统计学可信的结果，降低了操作者之间的偏差。

三、DIGE技术服务流程


四、DIGE技术服务内容
1、 样本制备与定量；
2、荧光标记；
3、双向电泳和图片分析；
4、DIGE实验报告提交。

五、送样须知：
1、技术咨询：在您开展实验之前，本公司将为您竭诚提供Zui有效的DIGE实验设计方案。
2、为了保证DIGE实验能顺利进行，样品须液氮或干冰保存寄送，广州本地客户可上门收样。
注：样本应避免各类污染和反复冻融。

六、实验报告内容
1、DIGE荧光电子图片；
2、蛋白质点定量分析结果，包括差异点号码、差异倍数、pI和MW等；
3、完整实验报告，包括实验步骤、使用仪器、软件检索参数等。

七、DIGE实验案例

DIGE定量分析结果。蛋白质样品经过荧光染料标记后双向电泳，ImageMaster7.0 (DIGE)分析差异点结果。

八、服务周期及收费标准：欢迎登陆 http://www.fitgene.com/ 服务

九、质量承诺：
1、cy2作为内标，确保定量的准确；
2、提供客观的DIGE实验分析结果。