壬基酚聚氧烯NP-40

NP-40（全称：Nonidet P-40，也称为Tergitol-type NP-40）是一种非常常见的非离子型去垢剂。它的化学名称是壬基酚聚氧烯。

它的主要用途几乎全部集中在生物化学和分子生物学领域，特别是在细胞裂解和蛋白质研究中。

以下是NP-40的主要用途，按其重要性排序：

这是NP-40Zui核心的用途。研究人员用它来温和地破碎细胞膜，从而释放出细胞内的内容物（如蛋白质、核酸等），以便进行后续分析。

特点：温和

NP-40能够破坏细胞膜（质膜） 和核膜，但通常不会破坏细胞器（如线粒体、溶酶体、过氧化物酶体）的膜。

这使得研究人员可以选择性地提取细胞质蛋白和核蛋白，而将细胞器中的蛋白留在原位。这对于研究特定细胞区室中的蛋白质至关重要。

在从细胞中提取出总蛋白后，NP-40在后续的蛋白质分析步骤中也扮演着重要角色。

免疫沉淀和免疫印迹：在免疫沉淀实验中，NP-40被广泛用于裂解细胞和配制免疫沉淀洗涤缓冲液。它的作用是：

溶解膜蛋白：帮助将疏水性的膜蛋白从脂质双分子层中“拉”出来，使其溶于水溶液。

维持蛋白质天然构象：作为一种非离子去垢剂，它不会使蛋白质变性，能Zui大限度地保持蛋白质的活性和抗原性，这对于抗体与抗原的特异性结合非常重要。

减少非特异性结合：在洗涤步骤中，NP-40可以帮助洗去那些与珠子或抗体非特异性结合的杂蛋白，降低背景信号。

由于其温和的特性，在通过差速离心分离不同细胞器时，NP-40常被添加到缓冲液中，以帮助清除附着在细胞器膜上的其他蛋白成分，同时保持细胞器本身的完整性。

在RNA相关实验中，NP-40有时被用于裂解细胞以提取细胞质RNA。因为它能有效抑制核糖核酸酶 的活性，有助于保护RNA在提取过程中不被降解。